常用特殊染色技术
特殊染色的概念
为了显示组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的病变、异常物质、病原体等，需要选用相应的染色方法进行染色以显示这些目的成分，这是HE染色不能显示的，故称特殊染色，简称特染。
特殊染色的意义
1、特染能显示在常规染色切片中不明显的部分，如革兰氏染色、细菌染色。
2、区别HE染色中不能鉴别的组织病变，如VG染色区别胶原纤维和平滑肌。
3、显示某些常规染色中不能着色的物质，如网染才能显示网状纤维，常规HE染色是染不出来的。
因此，特染也是制片染色中不可缺少的组成部分，它在病理诊断中起到辅助作用，也为科研提供依据。
HE染色与特殊染色的区别
HE染色
更新
染料
苏木素伊红
各种染料
目的物
细胞核细胞质
正常组织成分及病变、异常物、病原菌
颜色
蓝色
红、黄、蓝、绿、紫等多种颜色
方法
单一
种类多复杂
常用的特殊染色
抗酸染色
年由埃利希首创并经F．齐尔改进而创造出的细菌染色法。
原理
分枝杆菌的细胞壁内含有有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，一般水溶性染料不易进入，所以分枝杆菌一般不易着色，所以要经过加热和延长染色时间来促使其着色。
因分枝菌酸与染料结合后，很难被酸性脱色剂脱色，故分枝杆菌又称抗酸杆菌。
抗酸染色结果
结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长。
背景及非抗酸性细菌呈蓝色
结核杆菌抗酸染色
结核杆菌荧光染色
抗酸染色在结核病病理诊断中的价值分析
医院病理科
★方法：选取年1月~年10月期间我院收治的例临床诊断疑似结核病患者作为研究对象，所有患者均接受抗酸染色检查，并以临床确诊结果作为金标准，计算抗酸染色检查对结核病的诊断敏感性、特异性、准确性以及抗酸染色检查对各部位结核病变的诊断符合率。
★结果：抗酸染色检查对结核病的诊断敏感性、特异性、准确性分别为96.05%、95.83%、96.00%，与临床确诊结果之间的一致性良好；抗酸染色检查对各部位结核病变的诊断符合率分别为肺结核98.68%、淋巴结核94.12%、结核性胸膜炎96.15%、支气管结核94.44%、脊柱结核93.33%，其中，抗酸染色对肺结核（94.29%）、肺外结核（97.56%）的诊断符合率相比，差异无统计学意义。结论：抗酸染色技术在结核病病理诊断中的应用价值较高，可对各部位结核病变予以有效检出，对提高结核病的诊断准确性具有重要的意义。
PAS染色〔碘酸雪夫染色，糖元染色〕
原理
PAS反应是经典的组织化学方法，用来显示组织细胞中的多糖或糖蛋白。含有乙二醇基的糖类，在过碘酸的作用下，经氧化而产生的双醛基，醛基进而与亚硫酸品红（Schiff试剂）结合，使无色液体变成紫红色染料，并沉着于含有多糖或糖蛋白的细胞或组织结构上。
PAS染色结果
糖原颗粒被Schiff试剂染色呈紫红色，细胞核被染成蓝色。
糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义
（1）肝及心肌糖原沉着症的诊断：糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。
（2）糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。
（3）骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断：此瘤80%细胞内有较多糖原，糖原染色为阳性，所以糖原染色为阳性（大多数细胞）可以协助诊断。
（4）间皮瘤或滑膜肉瘤与其它癌的鉴别：前者分泌含透明质酸的粘液，糖原染色为阳性，但透明质酸酶消化后即呈阴性反应，如有此染色特点，即可有助于诊断滑膜肉瘤或间皮瘤而不是癌。
AB/PAS染色法
McManus在年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该技术不仅能显示糖原，还能显示中性粘液性物质和某些酸性物质。阿尔辛蓝和PAS技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。AB-PAS染色液核心成分为阿尔辛蓝液和雪夫试剂，多用于粘液物质染色，糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白呈紫红色，其余呈蓝色。
AB/PAS染色结果
糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白
紫红色
酸性黏蛋白（硫黏蛋白和唾液黏蛋白）
蓝色
蛋白多糖和透明质酸
蓝色
网状纤维染色
网状纤维是网状结缔组织内的一种纤维。它由网状细胞产生，网状纤维细而有分支，穿行于细胞体和突起之间，共同构成网状支架。这种纤维用HE染色一般不易辨认。若用银氨溶液浸染能使纤维变成黑色，故又称嗜银纤维。
原理
氨银液被组织吸附与组织中的蛋白结合，经甲醛还原成黑色的金属银沉积于组织内及表面。用氯化金调色后，再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐，从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来。
网状纤维染色结果
网状纤维呈黑色
区别肿瘤的性质和来源
1．区别血管内皮瘤和血管外皮瘤。
2．淋巴瘤和网状细胞肉瘤。
3．尤文氏肉瘤与网状细胞肉瘤。
4．软骨粘液纤维瘤和粘液肉瘤。
5．脑膜瘤和星形细胞瘤。
Masson三色染色
又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
原理
与阴离子染料的大小和组织的渗透有关，分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构密度、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson三色染色在病理诊断中的意义
（1）器官硬化性疾病的观察：如肝硬变、心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。
（2）瘢痕与淀粉样物质鉴别：前者胶原纤维染色为阳性，后者为阴性。
（3）骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别：利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱，纵横交错，后者较规则。
Masson三色染色结果
胶原纤维蓝色
胞质、肌纤维、红细胞红色
总结
特殊染色试剂比较简单、操作方便快捷、结果明确、节约时间且价格低廉，作为免疫组化染色技术的补充，特殊染色是HE染色诊断一种不可或缺的技术。
同时有利于特殊染色技术的标准化、规范化，有利于推进特殊染色技术的深入发展，有利于特殊染色技术方法学的改进和提高。
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本文编辑：佚名
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